CpG寡聚脱氧核苷酸增强树突状细胞疫苗诱导的特异性抗前列腺癌作用

来源 :中华实验外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:majing1619
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目的 观察CpG寡聚脱氧核苷酸(CpG-ODN)对截短的人前列腺特异性膜抗原(tPSMA)基因修饰的树突状细胞(DCs)诱导的抗前列腺癌效应.方法 利用复制缺陷性腺病毒AdEasy-1系统,通过基因重组技术构建Ad-tPSMA及Ad-eGFP.将Ad-tPSMA和Ad-eGFP感染鼠源性DCs,用含10μg/L粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素(IL)-4和含10%胎牛血清(FCS)的RPMI 1640培养基诱导培养6 d后,然后再添加1 mg/L的CpG-ODN体外培养1 d,最后添加1 mg/L的脂多糖(LPS)继续培养1 d,使其成熟.流式细胞仪检测DCs细胞表型,CCK-8法检测混合淋巴细胞反应T细胞增殖能力,酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测T细胞分泌细胞因子[IL-2、干扰素(INF)-γ]的影响,CCK-8试剂检测T细胞特性杀伤靶细胞活性.结果 CpG-ODN促进Ad-tPSMA感染的DCs(CpG/DCs-Ad-tPSMA)高表达MHC Ⅱ(83.8±3.7)%、CD80(79.8±5.6)%和CD86(78.3 ±2.8)%,且刺激同种异体T细胞增殖能力明显高于DCs-Ad-tPSMA组、DCs-Ad-eGFP组和未转染的DCs组(P<0.05);培养上清中细胞因子IL-2(179.64±2.72)ng/L和INF-γ(1581.75±28.61)ng/L,表达水平均明显高于DCs-Ad-tPSMA组、DCs-Ad-eGFP组和未转染的DCs组(P<0.05);CpG/DCs-Ad-tPSMA组诱导RM-1-tPSMA细胞特异性杀伤率为(55.3±1.2)%,明显高于DCs-Ad-tPSMA组(40.7±1.4)%、DCs-Ad-eGFP组(12.7±1.2)%和未转染的DCs组(10.8±1.7)%(P<0.05).结论 CpG-ODN能增强PSMA基因修饰的DCs疫苗诱导的特异性抗前列腺癌效应.
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