【摘 要】
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采用RT-PCR技术从猪外周血单核细胞（PBMC）中获得猪白细胞抗原基因座P1、P14等位基因的胞外区,并在其3′端拼接上依赖BirA酶的可生物素化序列（BSP）,构建了pET-P1-BSP和pET-P14-BSP
【机 构】
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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,中国农业科学院研究生院
【基金项目】
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国家“863”计划资助项目（BA2006AA10A203）,黑龙江省自然科学基金资助项目（ZJN-0602-01）
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采用RT-PCR技术从猪外周血单核细胞（PBMC）中获得猪白细胞抗原基因座P1、P14等位基因的胞外区,并在其3′端拼接上依赖BirA酶的可生物素化序列（BSP）,构建了pET-P1-BSP和pET-P14-BSP高效表达载体并进行诱导表达和纯化,用SDS-PAGE和Western blotting法对表达产物进行鉴定。结果显示,成功构建了融合表达载体pET-P1-BSP和pET-P14-BSP,表达产物以包涵体的形式存在,获得高纯度的P1-BSP和P14-BSP蛋白,为进一步利用亲和素在体外构建SLA-
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