c-Src结构域真核表达载体的构建及鉴定

来源 :河南大学学报：自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：xiaochouyu005

【摘要】

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通过聚合酶链式反应（PCR）,将c-Src的三个结构域SH3、SH2和KD分别定向克隆至C端带有HA蛋白标签序列的真核表达载体pcDNA3中.经HindIII和XbaI双酶切分析和测序鉴定正确后,应用脂

【作者】

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张瑶楠石冲马永超王泽生张玉祥

【机构】

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首都医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系

【出处】

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河南大学学报：自然科学版

【发表日期】

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2011年5期

【关键词】

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SRC SH3 SH2 KD 真核表达载体 Src SH3 SH2 KD eukaryotic expression vector

【基金项目】

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国家自然科学基金资助项目（30873033）

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通过聚合酶链式反应（PCR）,将c-Src的三个结构域SH3、SH2和KD分别定向克隆至C端带有HA蛋白标签序列的真核表达载体pcDNA3中.经HindIII和XbaI双酶切分析和测序鉴定正确后,应用脂质体法转染HeLa细胞48 h,蛋白免疫印迹法可以检测到细胞内SH3、SH2和KD的表达,证明重组表达质粒pcDNA3-SH2、pcDNA3-SH3和pcDNA3-KD构建成功,为进一步研究Src激酶在肿瘤发生发展中的作用奠定了基础.

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