【摘 要】
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目的 探讨重组腺病毒(Ad)介导PUMA基因联合γ线对人胰腺癌的作用.方法 以不同感染复数(MOI)的Ad-PUMA(10、50、100)转染胰腺癌PANC-1细胞,RT-PCR和Western blot检测转染前后细胞内PUMA表达.PANC-1细胞分为4组:对照组、转染组、照射组、转染联合照射组.MTT比色法和流式细胞术检测各组细胞存活率和凋亡率.人胰腺癌裸鼠皮下移植瘤模型分为4组:对照组、转
【机 构】
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目的 探讨重组腺病毒(Ad)介导PUMA基因联合γ线对人胰腺癌的作用.方法 以不同感染复数(MOI)的Ad-PUMA(10、50、100)转染胰腺癌PANC-1细胞,RT-PCR和Western blot检测转染前后细胞内PUMA表达.PANC-1细胞分为4组:对照组、转染组、照射组、转染联合照射组.MTT比色法和流式细胞术检测各组细胞存活率和凋亡率.人胰腺癌裸鼠皮下移植瘤模型分为4组:对照组、转染组、照射组、转染联合照射组,在不同时间测量肿瘤生长速率和凋亡指数.结果 PUMA表达随病毒MOI增加而进行性增加(MOI=10、mRNA=0.46±0.02、蛋白=0.75±0.09;MOI=50、mRNA=1.12±0.09、蛋白=1.01±0.18;MOI=100、mRNA=1.50±0.08、蛋白=1.80±0.15;P<0.05),细胞增殖随病毒MOI增加逐渐受抑制(r=-0.98655),经γ线照射后增殖抑制更加明显(r=-0.971 26,P<0.05),而凋亡率上升(照射前=45.4%±5.26%,照射后=73.2%±6.62%,P<0.05).Ad-PUMA转染和±线联合照射后7～35 d,裸鼠肿瘤生长速率明显低于单纯照射组、单纯转染组和对照组[第35天肿瘤体积分别为(19.82±6.45)、(39.5±9.23)、(33.6±10.3)、(52.0±11.43)mm3,P<0.05],凋亡指数升高(AI分别为0.43±0.05、0.29±0.10、0.24±0.05、0.00±0.00,P<0.05).结论 PUMA基因转染联合γ线照射可增强对胰腺癌细胞杀灭作用,联合治疗明显优于单纯照射和单纯基因治疗。
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