人FGF12融合蛋白在大肠杆菌中的高效表达

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目的:在原核表达系统中获得高效表达的人成纤维生长因子12融合蛋白。方法:采用逆转录PCR方法获得hFGF12 cDNA,将其连接到pET 28a原核表达载体,转化入BL21(DE3)菌中表达,经金属螯合亲和层析法和肝素亲和层析法纯化,以刺激NIH 3T3成纤维细胞增殖实验;测定纯化的hFGFl2融合蛋白活性。结果:表达产物经SDS-PAGE电泳,在Mr31000附近新增一条明显区带,与预期的相对分子质量相符。重组融合蛋白能刺激NIH3T3细胞增殖。结论:在大肠杆菌中表达了具有促有丝分裂活性的融合蛋白。
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