【摘 要】
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目的 分析探讨β-淀粉样蛋白1～ 42(Aβ1～42)诱导ATP敏感性钾离子通道(KATP)亚基SUR1/Kir6.2蛋白表达上调的潜在信号转导机制.方法 采用免疫细胞化学法鉴定原代培养的大鼠皮质和海马神经元,实验组分别加入0.50 μmol/L核因子-κB(NF-κB)抑制剂SN50、2μmol/L p38丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)抑制剂SB203580或者2μmol/L蛋白激酶C(PKC)抑制剂CTC,于30 min后分别加入2 μmol/L Aβ1～42,培养72 h后采用Western blo
【机 构】
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271000泰安,山东第一医科大学第二附属医院康复医学科;271000泰安,山东第一医科大学第二附属医院消化内科;200120上海,同济大学附属东方医院神经内科
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目的 分析探讨β-淀粉样蛋白1～ 42(Aβ1～42)诱导ATP敏感性钾离子通道(KATP)亚基SUR1/Kir6.2蛋白表达上调的潜在信号转导机制.方法 采用免疫细胞化学法鉴定原代培养的大鼠皮质和海马神经元,实验组分别加入0.50 μmol/L核因子-κB(NF-κB)抑制剂SN50、2μmol/L p38丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)抑制剂SB203580或者2μmol/L蛋白激酶C(PKC)抑制剂CTC,于30 min后分别加入2 μmol/L Aβ1～42,培养72 h后采用Western blotting法检测KATP亚基SUR1/Kir6.2蛋白的相对表达量.结果 (1) NF-κB抑制剂SN50:SN50+ Aβ1～42组SUR1/Kir6.2蛋白表达量低于对照组(t=6.237,P=0.010;t=7.136,P=0.004)和Aβ1～42组(t=12.620,P=0.000;t=18.580,P=0.000),SN50组SUR1/Kir6.2蛋白相对表达量低于对照组(t=12.240,P=0.000;t=4.906,P=0.034)、Aβ1～42组(t=18.620,P=0.000;t=16.350,P=0.000)和SN50+ Aβ1～42组(t=6.002,P=0.012).(2) p38 MAPK抑制剂SB203580:SB203580+ Aβ1～42组SUR1/Kir6.2蛋白相对表达量低于Aβ1～42组(t=13.010,P=0.000;t=8.506,P=0.001),仅Kir6.2蛋白相对表达量高于对照组(t=7.537,P=0.003);SB203580组SUR1/Kir6.2蛋白相对表达量低于对照组(t=8.089,P=0.002;t=19.380,P=0.000)、Aβ1-42组(t=18.870,P=0.000;t=35.430,P=0.000)和SB203580+Aβ1～42组(t=5.869,P=0.014;t=26.920,P=0.000).(3)PKC抑制剂CTC:CTC+ Aβ1～42组SUR1蛋白相对表达量高于对照组(t=4.756,P=0.040)、但低于Aβ1～42组(t=15.170,P=0.000),CTC组SUR1蛋白相对表达量低于对照组(t=24.000,P=0.000)、Aβ1～42组(t=43.930,P=0.000)和CTC+ Aβ1～42组(t=28.760,P=0.000);CTC+ Aβ1～42组Kir6.2蛋白相对表达量低于对照组(t=15.000,P=0.000)和Aβ1～42组(t=24.140,P=0.000),CTC组Kir6.2蛋白相对表达量低于对照组(t=9.429,P=0.001)和Aβ1～42组(t=18.570,P=0.000)、但高于CTC+ Aβ1～42组(t=5.571,P=0.018).结论 NF-κB、p38 MAPK和PKC信号转导通路参与Aβ1～42上调大鼠皮质和海马神经元KATP亚基SUR 1/Kir6.2蛋白的表达.
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