NADPH依赖型谷氨酸脱氢酶的辅酶特异性改造

来源 :生物学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：sphjh

【摘要】

：

基于结构信息及保守序列比对,通过半理性设计和高通量筛选,将来源于Pseudomonas putida的NADPH依赖型谷氨酸脱氢酶PpGDH改造为NADH依赖型.与原始PpGDH相比,突变体PpGDH-D264V对NADH的偏好性(Ratioof kcat/Km)增强了1607倍,并具有对多种酮酸底物的催化活力,可用于制备多种非蛋白质氨基酸.对PpG-DH-D264V进行酶学性质表征,其最适温度为45℃,最适pH值8.0,T110 min/2温度达到58.1℃,在中性及弱碱性环境下具备良好的稳定性,为后续

【作者】

：

陆利兵周海胜吴坚平杨立荣

【机构】

：

浙江大学化学工程与生物工程学院生物工程研究所,杭州 310027

【出处】

：

生物学杂志

【发表日期】

：

2021年6期

【关键词】

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非蛋白质氨基酸谷氨酸脱氢酶烟酰胺辅酶半理性设计同源重组

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