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目的:探讨人端粒酶反转录酶(hTERT)修饰的内皮祖细胞(EPCs)移植对SD大鼠缺血肢体治疗机制和规律。方法:EPCs原代培养及鉴定后,脂质体法将PLXSN-hTERT稳定转染EPCs,Western blot鉴定外源hTERT基因在内皮祖细胞中的表达。64只雄性SD大鼠随机单位组设计分为4组:缺血对照组(A组)、hTERT治疗组(B组)、EPCs治疗组(C组)、转染hTERT基因的EPCs治疗组(D组),每组16只。结扎大鼠左股动脉及分支,构建后肢缺血模型。于内收肌和腓肠肌共注射5点,每点注射60μL,A组注射300μL培养液,B组注射DNA-脂质体复合物,C组注射4×10~6个EPCs,D组注射4×10~6个含hTERT基因的EPCs。于移植后4周行动脉造影,采用RT-PCR检测hTERT基因的体内表达,评价血管新生情况;荧光显微镜观察PKH-26标记的EPCs存活情况。结果:64只大鼠均造模成功。Western blot结果显示转染人hTERT基因的人内皮祖细胞体外能表达hTERT。移植后4周动脉造影显示,A组大鼠股动脉及其分支均未显影,B组和C组可见中等量新生血管,两组效果相似,C组可见有大量新生血管及丰富的侧枝循环建立。B组和C组均较A组新生血管数量增加,D组可进一步增强疗效PKH-26阳性细胞数:ABCD四组分别为[(0±0.00),(0±0.00),(27.46±5.48),(54.37±8.34)]个/HP;P<0.05。RT-PCR检测hTERT基因的体内表达,D组和B组均有扩增,D组hTERT mRNA相对含量高于B组。D组和B组hTERT mRNA相对含量分别为(0.89±0.06,0.29±0.04;P<0.05)。结论:通过人端粒酶反转录酶(hTERT)修饰的内皮祖细胞(EPCs)移植治疗大鼠肢体缺血,可以让hTERT基因稳定有效持续的表达,其效果优于直接基因注射。