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经生物学软件DNAStar分析，以牛传染性鼻气管炎病毒（BarthaNu／67）基因组DNA为模板，PCR扩增gD基因943bp的片段，将目的片段定向克隆到pET30a表达载体中，酶切及测序鉴定均正确后，转化BL21表达菌，经IPTG诱导得到部分可溶表达的重组蛋白。用Ni柱亲和层析法在非变性的条件下纯化重组蛋白，纯化的重组蛋白浓度为0．852mg／mL，纯度为85．2％。Western blot、间接ELISA检测证明纯化的重组蛋白具有良好的抗原性和特异性。