【摘 要】
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目的:探讨盐酸戊乙奎醚(PHC)对脂多糖(LPS)诱导气道平滑肌细胞(ASMC)炎性损伤及P38MAPK/JNK通路的影响.方法:体外培养人ASMC,将ASMC随机分成5组.对照组只含ASMC;LPS组在ASMC
【机 构】
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上海交通大学附属第九人民医院麻醉科,上海 200011
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目的:探讨盐酸戊乙奎醚(PHC)对脂多糖(LPS)诱导气道平滑肌细胞(ASMC)炎性损伤及P38MAPK/JNK通路的影响.方法:体外培养人ASMC,将ASMC随机分成5组.对照组只含ASMC;LPS组在ASMC中加入终质量浓度为500 ng.ml-1 LPS;1、10、100 μmol·L-1 PHC+LPS组分别在LPS组基础上加入终质量浓度为1、10、100 μmo.L-1 PHC.采用CCK-8法检测ASMC增殖情况;显微镜下观察细胞形态学变化;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测ASMC细胞因子乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)水平;采用Annexin V/PI双染法流式细胞术检测细胞凋亡;采用Western blotting检测凋亡及P38MAPK/JNK通路相关蛋白表达情况.结果:与对照组相比,LPS组ASMC 48 h时的吸光度(A)值显著降低(P＜0.05),细胞体积扁小,形态偏圆,胞质空亮,胞质内出现大小不等的颗粒,细胞因子LDH、MDA水平均显著升高(P＜0.05),细胞凋亡率显著升高(P＜0.05),抑凋亡基因Bcl-2蛋白表达水平显著降低(P＜0.05),促凋亡基因Bax蛋白表达水平显著升高(P＜0.05),p-JNK、p-P38蛋白表达水平显著升高(P＜0.05);给予PHC处理后,与LPS组相比,1、10、100 μmol·L-1 PHC+LPS组细胞48 h时的A值均显著升高(P＜0.05),细胞无明显形态学变化,且贴壁细胞数量多,细胞因子LDH、MDA水平均显著降低(P＜0.05),细胞凋亡率显著降低(P＜0.05),抑凋亡基因Bcl-2蛋白表达水平显著升高(P＜0.05),促凋亡基因Bax蛋白表达水平显著降低(P＜0.05),P-JNK、P-p38蛋白表达水平显著降低(P＜0.05),且呈剂量依赖性.结论:PHC可抑制LPS诱导的ASMC炎性损伤,其机制可能与抑制P38MAPK/JNK通路的活化有关.
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