【摘 要】
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本文就羊口疮病毒的纯化程、病毒囊膜蛋白亚单位的分离和鉴定作了一系列的探索性研究。试验结果表明,差速离心联用30—45%蔗糖密度梯度离心纯化羊口疮病毒的程序,具有操作简便、提纯度高、收获量大的优点,为纯化痘类病毒提供了一种较为理想的方法;中性无离子去污剂Triton X-100与2-ME一起,可有效地裂解羊口疮病毒,其使用最适比例是去污剂缓冲液:病毒为1ml∶1mg,此去污剂缓冲液为0.01M Tr
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本文就羊口疮病毒的纯化程、病毒囊膜蛋白亚单位的分离和鉴定作了一系列的探索性研究。试验结果表明,差速离心联用30—45%蔗糖密度梯度离心纯化羊口疮病毒的程序,具有操作简便、提纯度高、收获量大的优点,为纯化痘类病毒提供了一种较为理想的方法;中性无离子去污剂Triton X-100与2-ME一起,可有效地裂解羊口疮病毒,其使用最适比例是去污剂缓冲液:病毒为1ml∶1mg,此去污剂缓冲液为0.01M Tris HCl、0.5M NaCl、1.5%Triton X-100 (pH7.8)。在同等条件下,中性无离子去污剂Triton X-100与NP-40可以互相替代;羊口疮病毒经SDS-PAGE分析,最少可泳动出28条多肽区带,其分子量范围在14—190K道尔顿之间,病毒囊膜蛋白亚单位由18条多肽区带组成,主要多肽区带的分子量为45.7、40.7、38.0和33.1K道尔顿,这些区带均位于病毒粒子的表面;用病毒亚单位免疫羊只,能有效地激发机体产生抗全病毒抗体(免疫后14天血清平均ELISA单位数增高,21天达到高峰),而且还能诱导部分羊只发生细胞免疫反应(皮内迟发性变态反应阳性),证明这种亚单位制剂对羊只具有免疫原性。
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