【摘 要】
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目的分离、克隆恶性疟原虫带7蛋白家族蛋白编码基因pfstom,并对其功能进行初步研究.方法根据国际恶性疟研究公共数据库释放的已完成序列数据(CoDing Sequence,CDS数据)设计引
【机 构】
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中国医学科学院,中国协和医科大学,基础医学研究所病原系,分子寄生虫学实验室,北京,100005
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目的分离、克隆恶性疟原虫带7蛋白家族蛋白编码基因pfstom,并对其功能进行初步研究.方法根据国际恶性疟研究公共数据库释放的已完成序列数据(CoDing Sequence,CDS数据)设计引物,用RT-PCR方法从恶性疟原虫中国海南株(FCC1/HN)中得到其带7蛋白家族蛋白基因cDNA-pfstom.应用多种软件对其结构功能、基因进化特征以及同源性分析.用pET30a系统表达其具有stomatin样蛋白结构域的C端蛋白,免疫新西兰大白兔并纯化抗体.Western杂交检测其在FCC1/HN表达情况.结果pfstom基因编码区全长1 125 bp,编码374个氨基酸,C端具有和人红细胞整合膜蛋白带7蛋白家族中stomatin样蛋白类似的结构.进化特征分析显示:在带7蛋白家族中,Pfstom蛋白与stomatin样蛋白亲缘关系较近.Western杂交发现Pfstom蛋白在FCC1/HN的滋养体期呈期特异性表达,在与膜相关和与膜不相关的感染红细胞蛋白提取物中都存在.结论Pfstom是带7蛋白家族蛋白,在FCC1/HN红内期的滋养体期呈特异性表达,环状体期不表达,该蛋白是膜相关蛋白.
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