HOGG1基因特异性锤头状核酶表达载体的构建及其在细胞中表达的研究

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目的:设计并合成人8-羟基鸟嘌呤-DNA糖苷酶(HOGG1)特异性的锤头状核酶(hammerhead ribozyme)基因并构建其真核表达载体.初步探讨其在A549细胞中的瞬时表达效应.方法:运用计算机软件人工设计并合成核酶基因(RZ),将核酶基因克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)中,阳性重组子由BamHⅠ和EcoRⅠ酶切,琼脂糖凝胶电泳鉴定及DNA测序证实.大量抽提阳性重组子并在非脂质体转染试剂FuGENE 6的介导下引入人肺腺癌细胞株A549,RT-PCR(逆转录多聚酶链反应)法半定量检测转染
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