【摘 要】
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本研究从猪囊尾蚴虫体中提取总RNA,用磷蛋白特异性引物,通过RT-PCR扩增出-366bp的片段,扩增产物连接到PGEM-Teasy载体中,经酶切鉴定、PCR分析以及确证性测序后证明,所克隆的3
【机 构】
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中国农业科学院兰州善医研究所畜禽病毒病重点实验室,甘肃农业大学动物医学院
【基金项目】
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国家重点基础研究发展计划(973计划)
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本研究从猪囊尾蚴虫体中提取总RNA,用磷蛋白特异性引物,通过RT-PCR扩增出-366bp的片段,扩增产物连接到PGEM-Teasy载体中,经酶切鉴定、PCR分析以及确证性测序后证明,所克隆的366bp的片段含P2蛋白基因完整的开放阅读框.将重组质粒PGEM-P2和表达载体pProEX-HTb分别酶切后,亚克隆至原核表达载体pProEX-HTb中,筛选阳性克隆,用IPTG诱导表达,收集不同时间的菌液进行SDS-PAGE电泳、Western blot分析,结果表明,磷蛋白基因p2在大肠杆菌中成功表达,其表达
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