pcDNA3．1（－）／PSMA7真核表达质粒的构建及其在A549细胞中的表达

来源 :解放军医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：libq19811022

【摘要】

：

目的构建pcDNA3.1（—）／PSMA7真核表达质粒并建立人肺腺癌细胞株A549的稳定表达株。方法采用RT-PcR法从正常人支气管上皮细胞株HBE135-E6E7中克隆得到PSMA7cDNA全长序列，将之与pMD

【作者】

：

谭家余罗雅玲黄湘孙海霞

【机构】

：

南方医科大学南方医院呼吸内科,嘉应学院医学院基础部病原教研室

【出处】

：

解放军医学杂志

【发表日期】

：

2008年11期

【关键词】

：

PSMA7蛋白人质粒真核细胞肿瘤细胞培养的 A549细胞 PSMA7 protein human plasmids eukaryotic cel

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目的构建pcDNA3.1（—）／PSMA7真核表达质粒并建立人肺腺癌细胞株A549的稳定表达株。方法采用RT-PcR法从正常人支气管上皮细胞株HBE135-E6E7中克隆得到PSMA7cDNA全长序列，将之与pMD18-T载体连接。双酶切和测序鉴定后，再将PSMA7片段亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1（—）上。构建好的pcDNA3．1（—）／PSMA7真核表达质粒经双酶切和测序鉴定后，经脂质体转染法转入A549细胞株中，经G418筛选，得到阳性克隆细胞株，再用RT-PCR及Western blotti

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