【摘 要】
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目的 构建大鼠5-羟色胺1A受体(5-HT1AR)超表达细胞株.方法 从雄性SD大鼠脑组织中提取总RNA,构建真核表达质粒pc-DNA3.1/hisC-Rat-5-HT1AR.提取和纯化该真核表达质粒,并采用脂质转染法转染到人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y细胞.经G418筛选,获得SH-SY5Y-Rat-5-HT1AR细胞株.采用Western blot法鉴定5-HT1AR蛋白表达;光镜下观察细胞
【机 构】
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050051,石家庄市,河北医科大学第三医院麻醉科,050051,石家庄市,河北医科大学第四医院门诊手术室,050051,石家庄市,河北医科大学第三医院麻醉科,河北省人民医院心血管内科,河北医科大学内
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目的 构建大鼠5-羟色胺1A受体(5-HT1AR)超表达细胞株.方法 从雄性SD大鼠脑组织中提取总RNA,构建真核表达质粒pc-DNA3.1/hisC-Rat-5-HT1AR.提取和纯化该真核表达质粒,并采用脂质转染法转染到人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y细胞.经G418筛选,获得SH-SY5Y-Rat-5-HT1AR细胞株.采用Western blot法鉴定5-HT1AR蛋白表达;光镜下观察细胞的形态;四甲基偶氮唑盐比色法测定细胞活力;细胞免疫荧光染色后,共聚焦显微镜下观察5-HT1AR表达.结果 成功构建了重组质粒pc-DNA3.1/hisC-Rat-5-HT1AR.重组质粒顺利转染SH-SY5Y细胞,构建了稳定表达大鼠5-HT1AR的细胞株SH-SY5Y-Rat-5-HT1AR.SH-SY5Y-Rat-5-HT1AR细胞呈梭状,细长,突起长而少.SH-SY5Y-Rat-5-HT1AR细胞的活力明显低于SH-SY5Y细胞.共聚焦显微镜下5-HT1AR主要在细胞膜表达.结论 成功地构建了大鼠5-HT1AR超表达细胞株。
其他文献
目的 比较七氟醚和异丙酚对骨科手术患者止血带诱发肢体缺血再灌注损伤的影响.方法 择期行膝关节韧带修复术患者54例,性别不限,年龄18～64岁,体重44 ～ 85 kg,ASA分级Ⅰ或Ⅱ级,采用随机数字表法,将患者随机分为3组(n=18)∶对照组(C组)、异丙酚组(P组)和七氟醚组(S组).行腰丛联合坐骨神经阻滞后,P组静脉注射异丙酚2 ～4 mg/kg麻醉诱导,并置入喉罩,术中静脉输注异丙酚2～4
硬膜外麻醉时手术病人常常伴有不同程度的精神紧张、焦虑和恐惧感,可诱发强烈的应激反应,因此需要辅助适度的镇静.有研究表明,硬膜外阻滞可增强全麻药的镇静效应[1-2].而硬膜外阻滞范围是否影响全麻药的镇静效应有待进一步探讨.异丙酚是临床上常用的静脉麻醉药.本研究拟评价硬膜外阻滞范围对大鼠异丙酚镇静效应的影响,以评价硬膜外阻滞增强全麻药镇静效应是否与阻滞范围有关。
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目的 探讨乌司他丁预先给药对肝切除术大鼠氧化应激反应和肝细胞生长因子(HGF)的影响.方法 健康清洁级雄性SD大鼠112只,体重230 ～ 280 g,3月龄,采用随机数字表法,将大鼠随机分为2组(n=56):肝切除术组(H组)和乌司他丁预先给药组(U组).2组切除肝左叶和中叶并阻断肝右叶和尾叶的血流进行缺血,30 min时恢复灌注,U组于缺血前5 min静脉注射乌司他丁50000U/kg.每组分
目的 评价洗入高浓度七氟醚麻醉诱导对低龄婴儿心功能的影响.方法 择期行体表血管瘤切除术婴儿,28 ～ 60 d龄,ASA分级Ⅰ级,按体重3.0～3.4 kg、3.5 ～ 3.9 kg、4.0～4.4 kg、4.5～4.9kg、5.0～5.4kg、5.5～5.9kg、6.0～6.4kg、6.5～6.9kg分为8个区组,每一区组3例患儿,采用随机数字表法,将其随机分为3组(n=8):吸入6％、7％和8
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目的 探讨顺铂(DDP)联合加热对体外血液中肝肿瘤细胞的杀灭作用及对红细胞的影响.方法 将肝肿瘤细胞2 ml加入10 ml红细胞悬液中,充分混匀后,分别取2 ml于离心管中.采用随机数字表法,将其随机分为6组(n=30):A组、D组各加入2 ml生理盐水,B组、E组各加入2 mlDDP(终浓度为100 μg/ml),C组和F组各加入2 ml DDP(终浓度为200 μg/ml).充分混匀后,A组、
患儿,男性,年龄11月,体重8 kg,主因出生后进行性排便困难9月余,严重腹胀、呕吐2 d,急诊入院.查体:表情淡漠,哭声低下,纳呆,头大,颈粗短,眼距宽,眼睑浮肿,舌外伸,全身皮肤粗糙,面颊部及双下肢粘液性水肿,腹部膨隆,体温36℃,脉搏94次/min.化验检查:总三碘甲状腺原氨酸(T3)0.009 nmol/L,总甲状腺素(T4)24.63 nmol/L,游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)2.73
目的 评价线粒体通透性转换孔(mPTP)在舒芬太尼后处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用.方法 雄性SD大鼠60只,体重350 ～ 420 g,14～ 15周龄,采用随机数字表法,将大鼠随机分为4组(n=15):假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)、环孢菌素A组(CP组)、舒芬太尼后处理组(SP组).采用结扎左冠状动脉前降支30 min后再灌注的方法制备心肌缺血再灌注模型.于再灌注前5 m
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