【摘 要】
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通过建立A549肺泡上皮细胞氧糖剥夺/恢复(oxygen-glucose deprivation/recovery,OGD/R)模型,模拟临床体外循环中肺泡上皮细胞缺血-再灌注过程,观察OGD/R是否引发A549细胞焦亡
【机 构】
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重庆医科大学附属儿童医院麻醉科,国家儿童健康与疾病临床医学研究中心,儿童发育疾病研究教育部重点实验室,儿科学重庆市重点实验室,重庆400014
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通过建立A549肺泡上皮细胞氧糖剥夺/恢复(oxygen-glucose deprivation/recovery,OGD/R)模型,模拟临床体外循环中肺泡上皮细胞缺血-再灌注过程,观察OGD/R是否引发A549细胞焦亡,为进一步探讨CPB相关肺损伤发生机制提供参考.采用RT-qPCR法和Western blot法检测焦亡相关基因Caspase1、ASC、NLRP3、GSDMD的mRNA转录和蛋白质表达水平,并进一步观察Caspase1特异性拮抗剂VX-765对Caspase1、焦亡效应蛋白GSDMD、培养上清液中Caspase1焦亡效应产物IL-1β、IL-1β表达水平以及细胞存活率的影响.结果 显示与对照组相比,OGD/后A549细胞Caspase1活性增高(P＜0.05),焦亡相关基因Caspase1、ASC、NLRP3、GSDMD的mRNA和蛋白质表达均上调(P＜0.05);采用拮抗剂VX-765预处理后,细胞焦亡相关蛋白Caspase1、GSDMD表达量明显减少(P＜0.05),细胞培养上清液中焦亡标志产物细胞因子IL-1p、IL-18水平显著下降(P＜0.05),细胞存活率得到恢复.该研究表明,氧糖剥夺/恢复可诱导A549肺泡上皮细胞发生焦亡,抑制细胞焦亡的发生对氧糖剥夺/恢复细胞模型具有保护作用.
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