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盐度是影响刺参(Apostichopus japonicas)生长发育最重要的环境因子之一,而microRNAs(miRNAs)可通过与靶基因的m RNA特异性结合,实现对其靶基因的表达调控。为探究Aja-mi R-22和Aja-mi R-27及对应的两个靶基因在刺参低盐海水胁迫下的表达情况,本实验将刺参放入盐度18低盐海水中进行胁迫,取盐度胁迫后的3 h、6 h、12h、24 h、48 h和72 h不同时间点和正常盐度海水中刺参的体腔液,提取RNA和miRNA,利用qRT-PCR技术进行表达分析。结果表明Aja-mi R-22和Aja-mi R-27这两个mi RNA在盐度胁迫后各时段均呈现出上调表达趋势,且都在胁迫后3h达到最大值,分别为对照组的36倍和16倍。Aja-mi R-22和Aja-mi R-27在胁迫后各个表达量都均高于对照组,其中Aja-miR-22在胁迫后3 h、48 h与对照组差异极显著(P<0.01), Aja-mi R-27在胁迫后3 h、48 h、72 h与对照组差异极显著(P<0.01)。靶基因棘皮动物微管相关蛋白(77 k D echinoderm microtubule-associated protein)与一般转录因子IIE亚基2 (general transcription factor IIE subunit 2)的表达趋势基本一致,在胁迫后3 h降到最低值,其中棘皮动物微管相关蛋白(EMAP)在胁迫后各个时间点表达量均低于对照组,除胁迫后48h外其余时间点均与对照组差异极显著(P<0.01),而一般转录因子IIE亚基2 (general transcription factor IIE subunit 2)在胁迫后48 h和胁迫后72 h的表达量与对照组差异极显著(P<0.01)。Aja-mi R-22和Aja-mi R-27的表达趋势与其靶基因表达模式在24h前均呈现负相关关系。上述研究结果说明Aja-mi R-22和Aja-mi R-27及其对应的靶基因在刺参的盐度适应调节机制中发挥作用。