逆转录病毒载体介导反义K—ras基因治疗胰腺癌的实验研究

来源 :世界华人消化杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：wfj0808

【摘要】

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目的：分离及克隆胰腺癌细胞基因组中K-ras基因片段，构建含反义K-ras癌基因逆转录病毒载体并探讨其对胰腺癌细胞增生、凋亡的影响及可能的分子机制．方法：设计2对PCR引物，分别在上下

【作者】

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蒋奎荣刘训良苗毅卢春戴存才徐泽宽钱祝银

【机构】

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南京医科大学第一附属医院胆胰外科,南京医科大学免疫学与微生物学系

【出处】

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世界华人消化杂志

【发表日期】

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2004年11期

【关键词】

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逆转录病毒载体介导反义K—ras基因治疗胰腺癌实验研究

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目的：分离及克隆胰腺癌细胞基因组中K-ras基因片段，构建含反义K-ras癌基因逆转录病毒载体并探讨其对胰腺癌细胞增生、凋亡的影响及可能的分子机制．方法：设计2对PCR引物，分别在上下游引物中引进BamHI和EcoRI位点，以胰腺癌细胞株BxPC-3、PC-3基因组DNA为模板扩增K-ras基因外显子1、4及侧翼序列，将目的基因克隆入逆转录病毒载体pLXSN中，构建重组质粒，经PT-67细胞包装后获得重组逆转录病毒．将该重组逆转录病毒转染上述细胞，经G418筛选获得稳定细胞，应用MTF、流式细胞仪和免疫组

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