【摘 要】
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目的:观察多西紫杉醇是否诱导前列腺癌PC-3细胞产生自噬,并初步探讨其可能机制。方法:实验应用MTT法测定细胞的增殖率;透射电镜观察细胞超微结构的变化;免疫荧光和Western bl
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目的:观察多西紫杉醇是否诱导前列腺癌PC-3细胞产生自噬,并初步探讨其可能机制。方法:实验应用MTT法测定细胞的增殖率;透射电镜观察细胞超微结构的变化;免疫荧光和Western blot分别定性和定量检测自噬相关蛋白Ⅱ型微管相关蛋白轻链3蛋白(microtubule-associated protein 1 light chain 3 typeⅡ,LC3-Ⅱ)、底物蛋白(sequestosome 1/SQSTM1,P62)表达水平,RT-PCR检测自噬相关基因Beclin-1 mRNA。结果:MTT结果显示多西紫杉醇能有效抑制PC-3细胞增殖(F=58.684,P=0.000);10-6 mol/L多西紫杉醇处理PC-3细胞24 h,即可发生明显的自噬,透射电镜观察到自噬体双层膜结构的形成。免疫荧光和Western blot结果显示多西紫杉醇处理PC-3细胞后P62表达降低(P=0.003、P=0.000、P=0.000),LC3-Ⅱ表达增强(P=0.002、P=0.000、P=0.000),RT-PCR结果显示多西紫杉醇处理PC-3细胞后可引起细胞Beclin-1 mRNA水平的上调(P=0.000、P=0.000、P=0.000)。结论:多西紫杉醇可以有效抑制前列腺癌PC-3细胞的增殖并诱导自噬,其发生可能与通过上调Beclin-1的mRNA水平有关。
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