去铁胺对高铁环境下成骨细胞分化的影响

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目的

观察去铁胺(DFO)对于高铁环境[利用枸橼酸铁铵(FAC)提供铁离子制作高铁环境]下成骨细胞分化的影响。

方法

通过细胞计数试剂盒(CCK-8)法确定FAC及DFO的干预计量。实验分为3组:对照组、50 μmol/L FAC干预组、FAC+DFO组(50 μmol/L FAC干预同时加入20 μmol/L DFO)。干预后3组细胞分别行碱性磷酸酶(ALP)染色和活性定量,茜素红染色、钙结节计数,对成骨相关基因[Runt相关基因2(Runx2)、锌指转录因子SP7、骨γ羧基谷氨酸(Bglap)、骨保护素(OPG)]利用实时荧光定量核酸扩增检测系统(QPCR)检测其mRNA的表达水平。

结果

CCK-8结果显示,50 μmol/L FAC干预组成活率为(95.6±0.7)%,20 μmol/L DFO干预组成活率[(97.6±0.5)%]不影响细胞活性,各组差异无统计学意义(P=0.427)。与对照组比较,FAC干预组,成骨相关基因Runx2、Sp7、Bglap、OPG表达下降;而FAC+DFO干预组与FAC干预组比较成骨相关基因表达上升,差异有统计学意义(P=0.026)。ALP染色及活性定量和茜素红染色及结节计数与对照组比较,FAC组结节计数(36±3)下降,而FAC+DFO组结节计数(120±6)比FAC组上升,差异有统计学意义(P=0.017)。

结论

在高铁环境中,成骨细胞分化受到抑制;DFO干预可在一定程度上恢复高铁环境下成骨细胞分化。

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