鸭坦布苏病毒JM株E蛋白的截断表达及间接ELISA方法的建立

来源 :中国动物传染病学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:deannazhu
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本研究利用RT-PCR扩增鸭坦布苏病毒(DuckTembusuvirus,DTMUV)JM株E基因截断片段(822bp),并将其克隆至原核表达载体pET32a(+),成功构建了重组质粒pET32a-E。重组质粒转化大肠杆菌Rosseta,经IPTG诱导得到了高效表达。Westernblot分析表明,重组蛋白能与DTMUV阳性血清发生特异性反应。将纯化好的DTMUVE蛋白作为包被抗原,建立了检测DTMUV血清抗体的间接ELISA方法。经过条件优化,确定了抗原最适包被浓度为0.093μg/孔,血清的最佳稀释度
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