双抗夹ELISA法检测双歧杆菌反应条件的优化

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研究利用双抗夹心酶联免疫吸附法(Double-antibody Sandwich Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,Double-antibody Sand wich ELISA)快速检测双歧杆菌(Bifidobacterium)的最佳反应条件.使用实验室自制的兔抗两歧双歧杆菌免疫血清和鼠抗两歧双歧杆菌免疫血清,利用方阵法对两种血清抗体的反应浓度进行筛选,之后对包被液、封闭液、封闭时间及底物作用时间进行比较和选择,从而确定运用双夹心ELISA法快速检测双歧杆菌的最佳反应条件.最佳反应条件分别为:兔抗两歧双歧杆菌免疫血清和鼠抗两歧双歧杆菌免疫血清反应浓度分别为1:1280,1:320,包被液浓度0.05 mol/L(pH值为9.6)的Na2CO3-NaHCO3,封闭液为质量分数为5%的BSA-PBS,封闭30min,底物作用时间为30min.优化了双抗夹心ELISA法检测双歧杆菌的反应条件,为双歧杆菌的血清学检测提供了参考.
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