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目的 探讨不同初始接种密度的骨髓基质干细胞(BMSCs)接种至磷酸钙骨水泥(CPC)支架上对细胞增殖和成骨分化效果的影响,并验证BMSCs生长在CPC上的生物黏附性能.方法 培养小型猪的BMSCs至第4代,按1、5、25 mol/mL 3种细胞接种密度接种至CPC支架上,成骨诱导培养1、4、8d时采用扫描电镜观察细胞黏附形态及性能,EdU法检测细胞增殖率,活/死细胞染色试剂盒检测活细胞百分比及黏附性能、单位面积活细胞数,茜素红染色法检测矿物质合成,实时聚合酶链式反应(RT-PCR)检测成骨基因碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OC)、Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、RUNT相关转录因子-2(Runx-2)的mRNA的表达.结果 BMSCs在CPC支架表面黏附扩展良好,细胞接种密度从l mol/mL上升至25 mol/mL,活细胞百分比、单位面积活细胞数、矿物质合成、成骨分化基因也相应升高.ALP表达量在4d时达峰值,5 mol/mL组和25 mol/mL组的ALP表达量均高于1 mol/mL组,差异有统计学意义(P<0.05),5 mol/mL组与25 mol/mL组之间差异无统计学意义(P>0.05).OC、Col-Ⅰ、Runx-2的mRNA表达量在培养8d时明显增高,此时5 mol/mL组与25 mol/mL组差异均无统计学意义(P>0.05).培养4、8d时5 mol/mL组与25 mol/mL组的活细胞百分比、单位面积活细胞数比较差异均无统计学意义(P>0.05).结论 BMSCs的初始接种密度并非越高越好,在5 mol/mL至25mol/mL之间时,细胞接种至复合生物功能化CPC支架上,更利于细胞的增殖、分化和细胞外基质的合成,且具有良好的生物黏附性能。