【摘 要】
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为制备猪圆环病毒2型(PCV2)特异性高免卵黄抗体(IgY),本研究首先对2017年~2018年河南部分地区规模化养猪场采集的19份疑似感染PCV2猪的病料样品进行PCR检测,对阳性样品进行PCV
【机 构】
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南阳师范学院河南省伏牛山昆虫生物学重点实验室/南阳市兽医生物工程技术研究中心;
【基金项目】
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河南省重点研发与推广专项(182102110240)
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为制备猪圆环病毒2型(PCV2)特异性高免卵黄抗体(IgY),本研究首先对2017年~2018年河南部分地区规模化养猪场采集的19份疑似感染PCV2猪的病料样品进行PCR检测,对阳性样品进行PCV2全基因组测序分析、病毒分离鉴定、制备灭活疫苗免疫蛋鸡并制备其Ig Y,对制备的Ig Y经中和试验检测其中和活性。比较氯仿法与水稀释-硫酸铵沉淀法制备的Ig Y的纯度差异。结果显示,河南省部分地区的PCV2阳性率为63.2%(12/19)。PCV2全基因组序列分析显示,12株PCV2之间的同源性为96.9%~100%,与其它PCV2代表株之间的同源性为95.1%~99.9%。遗传进化分析显示,8株PCV2属于PCV2d亚型,4株属于PCV2b亚型。病毒分离结果显示,7份阳性样品可以分离出病毒,其中一株病毒效价达106.5TCID50/mL。用该株病毒制备的PCV2灭活疫苗免疫蛋鸡能够诱导其产生较高水平的特异性Ig Y。中和试验结果显示,该Ig Y对PCV2具有较高的中和活性,中和效价达1∶181。此外,通过比较氯仿法和水稀释-硫酸铵沉淀法制备Ig Y的效果显示,两种方法均较为理想,但前者获得的样品纯度更高。本研究为进一步开展Ig Y抗PCV2研究奠定了基础。
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