MiR-107靶向Notch2促进胃癌细胞迁移和侵袭

来源 :第三军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:MM_8023
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目的 检测微小RNA-107(miR-107)在胃癌细胞中的表达,探讨其调控胃癌细胞迁移和侵袭的分子机制.方法 采用Real-time PCR检测miR-107和Notch2在人胃癌细胞MKN45和人胃黏膜上皮细胞GES-1中的表达.转染miR-107 inhibitors至MKN45细胞,采用Transwell法检测MKN45细胞迁移和侵袭.转染Notch2过表达载体至MKN45细胞,采用Transwell、Real-time PCR、Weate blot分别检测细胞迁移、侵袭和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的表达.Targetscan在线预测和双荧光素酶报告基因实验验证miR-107和Notch2的靶向关系.Transwell实验检测抑制miR-107并沉默Notch2后MKN45细胞迁移和侵袭.结果 与GES-1细胞比较,MKN45细胞中miR-107表达上调(P<0.01),而Notch2表达下调(P<0.01).抑制miR-107或过表达Notch2,则MKN45细胞迁移和侵袭数减少(P<0.01),过表达Notch2能促进MMP-9 mRNA和蛋白的表达(P<0.01).Targetscan在线预测和双荧光素酶报告基因实验结果表明:Notch2是miR-107的潜在靶基因,抑制miR-107可促进Notch2表达(P<0.01).在MKN45细胞中沉默Notch2,可逆转miR-107抑制剂对细胞迁移和侵袭的抑制作用.结论 miR-107在胃癌细胞中表达上调,可通过靶向Notch2促进MMP-9表达,促进胃癌细胞迁移和侵袭.
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