摘  要：为了解猪伪狂犬病在规模化猪场的净化效果，采用ELISA对规模化猪场血清检测样品中猪伪狂犬病病毒gE抗体的水平进行判定。结果显示：净化前，3个规模化猪场共检测34份血清样品，其中猪伪狂犬病病毒gE抗体阳性3份，抗体阳性率达8.8%。采取净化措施后，3个猪场共检测34份血清样品，未检出猪伪狂犬病病毒gE阳性抗体，净化措施取得明显的效果。
　　关键词：猪伪狂犬病;gE抗体;检测;分析
　　中图分类号：S851 文献标志码：C 文章编号：1001-0769（2021）05-0055-02
　　猪伪狂犬病是目前影响我国养猪生产的主要传染病之一，近年来，通过加强免疫接种及生物安全措施，猪伪狂犬病的发生和流行得到了有效控制，发病率和死亡率明显降低。该病在成年猪上一般为隐性感染，但可导致繁殖障碍，给猪场造成一定的经济损失，采取净化措施，可以根除隐性感染猪，提高猪场的经济效益。
　　1  材料与方法
　　1.1 仪器与试剂
　　全自动酶标分析仪（北京普朗新技术有限公司，型号DNM9602）。
　　猪伪狂犬病病毒gE抗体检测试剂盒（上海博研生物科技公司，批号20210311）。
　　1.2 血样采集与处理
　　选择3家规模化猪场作为试验猪场，随机选取34头猪作为备检猪，耳静脉或前腔静脉采血2 mL，不加抗凝剂，血液自然凝固，待血清析出后，分离血清，留待检测。
　　1.3 检测方法
　　采用ELISA检测。首先在酶标反应板每孔加样品稀释液40 μL，然后加血清10 μL，用封板膜封板后置37 ℃孵育30 min，用洗涤液洗板5次，加入酶标试剂50 μL，继续孵育30 min，洗板后每孔先加入顯色剂A、B各50 μL，37 ℃避光显色15 min，每孔加终止液50 μL终止反应。以空白孔调零，450 nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。为了准确判定结果，设阴性对照、阳性对照。
　　1.4 净化方案
　　在执行生物安全措施的基础上，猪群按免疫程序进行免疫，一个月后检测疫苗抗体效价，出现阴性的，重新免疫，若疫苗抗体阳性，抗体水平合格，再进行猪伪狂犬病病毒gE抗体检测。如果gE抗体阳性，淘汰猪，如果gE抗体阴性，则无猪伪狂犬病野毒感染，建立健康示范群。
　　2  结果与分析
　　2.1 猪伪狂犬病净化gE前抗体检测结果
　　3家猪场共采集34份血清样品，采用ELISA检测猪伪狂犬病病毒gE抗体，1号猪场阳性数1个，抗体阳性率8.3%，2号猪场阳性数2个，抗体阳性率16.67%，3号猪场阳性数0个，平均阳性率为8.82%（表1）。
　　2.2 猪伪狂犬病净化后gE抗体检测结果
　　3家猪场共采集34份血清样品，采用ELISA检测猪伪狂犬病病毒gE抗体，阳性率为0（表2）。
　　2.3 分析与讨论
　　（1）猪伪狂犬病病毒免疫抗体检测不能区分人工免疫与自然感染，由于gE基因是猪伪狂犬病病毒的主要致病性基因，通过分支生物学技术，研发出gE基因缺失苗，猪接种该疫苗后，产生缺失基因的抗体，猪伪狂犬病病毒gE抗体的血清学检测很容易区分疫苗株与野毒株感染。
　　（2）通过gE抗体检测，淘汰处理阳性猪，消除传染源，从根本上净化猪伪狂犬病，实际净化效果表明，这一方法是可行的。
　　（3）加强免疫是关键：猪群全部使用猪伪狂犬病病毒 Bartha-K61株gE基因缺失弱毒疫苗免疫，同时结合抗体检测等结果，进一步调整免疫程序。
　　（4）ELISA技术具有特异性强、敏感、检测快速、适合群体检测等优点，在猪伪狂犬病病毒净化中，有很好的实用性。
　　参考文献
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