【摘 要】
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目的 鉴定大劣按蚊Torso-like(tsl)基因及表达特征,为深入研究tsl基因功能提供理论基础.方法 根据黑腹果蝇和冈比亚按蚊tsl基因,检索大劣按蚊全基因组并鉴别大劣按蚊tsl基因,
【机 构】
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中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所、国家热带病研究中心、WHO热带病合作中心、科技部国家级热带病国际联合研究中心、国家卫生健康委员会寄生虫病原与媒介生物学重点实验室(上海200025);上海交通大
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目的 鉴定大劣按蚊Torso-like(tsl)基因及表达特征,为深入研究tsl基因功能提供理论基础.方法 根据黑腹果蝇和冈比亚按蚊tsl基因,检索大劣按蚊全基因组并鉴别大劣按蚊tsl基因,设计特异性引物,并采用PCR和逆转录PCR技术扩增目的基因.利用生物信息学软件分析tsl基因编码TSL蛋白的理化性质、信号肽、跨膜结构、蛋白质二级结构和三级结构,并进行系统发育进化分析.利用实时荧光定量PCR技术检测该基因在大劣按蚊各组织中的表达水平.结果 大劣按蚊tsl基因全长16 751 bp,CDS区长1 134 bp,编码377个氨基酸.TSL蛋白属于亲水性稳定蛋白.经生物信息学预测,TSL蛋白为位于膜外的分泌蛋白,且包含信号肽;其二级结构含α-螺旋(51.72％)、延伸链(12.20％)、p-折叠(4.78％)和无规则卷曲(31.30％),且能以5cj9.1.A为模板进行3D同源建模.系统发育进化分析发现大劣按蚊TSL蛋白与法老按蚊TSL蛋白亲缘关系较近.实时荧光定量PCR检测显示,tsl基因在大劣按蚊头、胸、腹、足均有表达,且在头部表达量最高、足部表达量较低.结论 本研究从基因组水平鉴定了大劣按蚊tsl基因,分析了其蛋白结构及组织特异性表达特征,为进一步深入研究该基因功能奠定了基础.
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