【摘 要】
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目的探索从人体肿瘤局部引流淋巴结扩增免疫球蛋白基因构建噬菌体抗体库及从中筛选抗肿瘤单抗的可行性.方法从肺癌患者肺门淋巴结提取总RNA,经逆转录-聚合酶链反应扩增免疫球
【机 构】
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第三军医大学西南医院呼吸科,第三军医大学新桥医院呼吸科
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目的探索从人体肿瘤局部引流淋巴结扩增免疫球蛋白基因构建噬菌体抗体库及从中筛选抗肿瘤单抗的可行性.方法从肺癌患者肺门淋巴结提取总RNA,经逆转录-聚合酶链反应扩增免疫球蛋白重链Fd段和κ链基因,以pcomb3H为载体,构建噬菌体抗体库,以2株肺癌细胞对噬菌体抗体库进行6轮亲和筛选,再以人成纤维细胞进行2轮吸附,以筛选出抗肺癌细胞抗体.以细胞ELISA法初步鉴定抗体活性.结果构建成噬菌体抗体库,库容为7.5×107个克隆,κ链和Fd段基因与载体DNA的重组率分别为100%(10/10)和90%(9/
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