【摘 要】
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为建立特异灵敏的检测牛冠状病毒(BCoV)的TaqMan荧光定量RT-PCR方法,并对犊牛腹泻粪便样品进行检测。本实验根据牛冠状病毒(BCoV)聚合酶基因nsp10核苷酸序列分别设计了1对引
【机 构】
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西南民族大学生命科学与技术学院,国家现代农业产业技术体系四川省兽药创新团队
【基金项目】
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四川省应用基础项目(2017JY0066),十三五国家重点研发计划课题(2016YFD0500907),西南民族大学研究生“创新型科研项目”(CX2018SZ29)
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为建立特异灵敏的检测牛冠状病毒(BCoV)的TaqMan荧光定量RT-PCR方法,并对犊牛腹泻粪便样品进行检测。本实验根据牛冠状病毒(BCoV)聚合酶基因nsp10核苷酸序列分别设计了1对引物和探针,通过反应体系和条件的优化,建立了检测BCoV的TaqMan荧光定量RT-PCR方法。该方法在3.36×10^1拷贝/μL~3.36×10^9拷贝/μL,质粒标准品与Ct值呈现良好的线性关系,相关系数R^2=0.9996,扩增效率E=109%;该方法只特异性检出BCoV,而不能检出其它常见腹
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