【摘 要】
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目的 探讨组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylases,HDAC)抑制剂SAHA(suberoylanilide hydroxamic acid)对人肝癌SMMC-7721细胞的分化诱导作用.方法 倒置显微镜观察SAHA对SMMC
【机 构】
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杭州市萧山区第一人民医院普外科,武汉大学中南医院普外科,武汉大学医学院病毒学研究所
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目的 探讨组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylases,HDAC)抑制剂SAHA(suberoylanilide hydroxamic acid)对人肝癌SMMC-7721细胞的分化诱导作用.方法 倒置显微镜观察SAHA对SMMC-7721细胞形态的影响;MTT比色法测定SAHA对SMMC-7721细胞增殖的抑制情况;免疫细胞化学检测SAHA对SMMC-7721细胞中甲胎蛋白(AFP)和增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响;流式细胞术(FCM)分析细胞周期;RT-PCR方法榆测处理前后SMMC-7721细胞p21WAF1基因mRNA的表达变化.结果 实验组细胞增殖速度显著减慢,与正常细胞形念变化相似;MTT比色法测定结果显示不同浓度SAHA对SMMC-7721细胞的增殖均有抑制作用,并有明显的剂量依赖和时间依赖关系;免疫细胞化学检测显示SAHA能显著降低PCNA和AFP在SMMC-7721细胞中的表达;流式细胞仪检测结果显示,SMMC-7721细胞经SAHA处理后,G0/G1期细胞明显增加,S期细胞则明显减少,细胞被阻滞于G0/G1期;RT-PCR检测结果表明,实验组细胞中p21WAF1 mRNA的表达明显增加.结论 SAHA对人肝癌细胞具有显著的诱导分化作用,诱导肝癌细胞分化的机理可能与抑制HDAC的活性,上调p21 WAF1 mRNA表达,及阻滞肝癌细胞G0/G1期有关.
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