【摘 要】
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通过将谷胱甘肽键合到硅胶表面合成了同时具有弱阳离子交换(WCX)、疏水(HIC)和氢键作用的多功能色谱填料,该固定相在HIC和WCX模式下对蛋白都有很好的分离效果.实验通过计量置
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通过将谷胱甘肽键合到硅胶表面合成了同时具有弱阳离子交换(WCX)、疏水(HIC)和氢键作用的多功能色谱填料,该固定相在HIC和WCX模式下对蛋白都有很好的分离效果.实验通过计量置换保留模型对蛋白在谷胱甘肽键合柱上的色谱保留行为及机理进行了研究,结果发现,在流动相盐浓度较低时蛋白根据自身等电点高低通过静电作用力得以分离,而在高盐浓度下疏水和氢键作用力共同决定蛋白的保留.这种多作用力保留模式可有效提高色谱柱的选择性,尤其为蛋白质、多肽及氨基酸的高效分离提供新的解决思路.
A multifunctional chromatographic packing with weak cation exchange (WCX), hydrophobic (HIC) and hydrogen bonding was synthesized by bonding glutathione to the silica gel surface. This stationary phase has a high affinity for proteins both in HIC and WCX modes Good separation effect.Experimentally, the retention behavior and mechanism of protein on glutathione-bonded column were studied by measuring the displacement retention model.The results showed that when the mobile phase salt concentration is low, Is separated by electrostatic forces and hydrophobic and hydrogen bonding forces at high salt concentrations together determine the retention of the protein This multi-force retention mode effectively increases column selectivity, especially for proteins, peptides and amino acids Separation to provide new solutions.
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