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目的：构建类泛素FAT10高表达肝癌细胞株Hep3B的酵母双杂交用cDNA文库.方法：从肝癌细胞Hep3B中提取总RNA,分离mRNA.利用反转录酶M-MLV与Oligo（dT）AnchorPrimer合成1stStrandcDNA,用E.coliDNAPolymerase与E.coliDNALigase将RNA链置换成DNA链,合成2ndStrandcDNA.将双链cDNA与EcoRⅠAdaptor连接,然后用EcoRⅠ/XhoⅠ进行酶切.使用SpinColumn除去短链cDNA与pGADT7载体连接,