鸡胚成纤维细胞cDNA文库构建及其与禽呼肠孤病毒σA相互作用宿主蛋白的筛选

来源 :南方农业学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：liujm1006

【摘要】

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【目的】构建鸡胚成纤维细胞(CEF)的cDNA文库并筛选与禽呼肠孤病毒(ARV)σA蛋白相互作用的宿主蛋白,为揭示互作蛋白对ARV复制及凋亡的分子调控机制打下基础。【方法】采用TRI

【作者】

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叶丽娜谢芝勋谢丽基王盛邓显文谢志勤范晴黄娇玲

【机构】

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广西兽医研究所/广西畜牧疫苗新技术重点实验室

【出处】

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南方农业学报

【发表日期】

：

2019年6期

【关键词】

：

禽呼肠孤病毒 σA蛋白 CDNA文库互作蛋白酵母双杂交 avian reovirus σA protein cDNA library interacting

【基金项目】

：

国家自然科学基金项目(31660715,31160512),国家“万人计划”领军人才专项(2016-37),广西八桂学者专项(2019-79).

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【目的】构建鸡胚成纤维细胞(CEF)的cDNA文库并筛选与禽呼肠孤病毒(ARV)σA蛋白相互作用的宿主蛋白,为揭示互作蛋白对ARV复制及凋亡的分子调控机制打下基础。【方法】采用TRIzol法提取CEF细胞总RNA,以SMART技术和LD-PCR合成双链cDNA(ds cDNA),ds cDNA和pGADT7-Rec共转化Y187酵母感受态细胞,构建cDNA文库;将pGBKT7-σA诱饵质粒转至Y2HGold酵母感受态细胞中,并与构建的cDNA文库进行酵母双杂交筛选,筛选出的候选文库菌经质粒提取后与pGBK

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