【摘 要】
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用改良的SDS-CTAB酶裂解法提取了根瘤菌基因组DNA的模板,从100个10bp的随机引物中筛选出了16条在20个菌株上均能扩增出清晰的片段。应用L16(4 ^5)正交表研究了DNA模板、Mg^2+、Ta
【机 构】
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安徽科技学院生命科学学院,西南农业大学牧草与草食家畜重点实验室
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用改良的SDS-CTAB酶裂解法提取了根瘤菌基因组DNA的模板,从100个10bp的随机引物中筛选出了16条在20个菌株上均能扩增出清晰的片段。应用L16(4 ^5)正交表研究了DNA模板、Mg^2+、Taq酶、dNTPs和引物浓度对扩增迁移率重现性的影响,用这种方法建立的根瘤菌RAPD-PCR优化反应体系为:20μl体系中含2.5mg/L的DNA模板、2.00mmol/L的Mg^2+、1.00U的Taq酶、0.05mmol/L dNTPs、0.35μmol/L随机引物。
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