目的研究周围神经内部运动神经纤维和感觉神经纤维经Karnovsky-Roots染色后的显微拉曼光谱特征及该法对两种不同功能性质的神经纤维进行快速识别。方法取新西兰大白兔20只,分别取其双侧骶1脊神经前根和后根各20例标本作30μm冰冻切片,切片在Karnovsky-Roots染色30min前后分别在显微拉曼光谱仪下用波长633nm的激光束聚焦于神经纤维断面进行拉曼光谱采集。取其中各1例脊神经前根和后根标本染色8h后作同样处理。对2 100cm-1和1 440cm-1拉曼强度的比值进行统计分析,获得可以区分运动神经纤维和感觉神经纤维的分类算法;将其余各20例脊神经前根和后根标本经染色30min后的拉曼光谱与解剖学"金标准"比较,行诊断性试验。结果 (1)染色30min后,运动神经纤维的拉曼光谱在2 100~2 160cm-1出现明显的拉曼强度,在感觉神经纤维的拉曼光谱中则没有;(2)染色30min后运动神经纤维I2100/I1440比值与感觉神经纤维相比差异具有统计学意义;I2100/I1440>0.2的神经纤维可以认为是染色结果阳性,即为运动神经纤维。结论经纤维经Karnovsky-Roots染色30min后,运动神经纤维与感觉神的拉曼光谱可根据I2100/I1440比值加以区分。显微拉曼光谱可以显著加快Karnovsky-Roots染色鉴别运动神经纤维和感觉神经纤维功能性质的速度。