目的观察重组人可溶性CD40配体(rhsCD40L)及CD40L基因转染细胞(CD40L-TC)对恶性B淋巴细胞体外生物学行为的影响,探讨rhsCD40L在肿瘤生物治疗中的可能作用.方法利用基因工程技术获得了rhsCD40L和CD40L-TC,分别与恶性B淋巴细胞株XG2、XG7、U266、8226、Raji及Daudi共同作用,分析了CD40激发对肿瘤细胞的体外增殖(锥虫蓝计数法)、细胞周期(碘化丙锭掺入法)、细胞表面共刺激分子的表达(免疫荧光标记法)以及细胞凋亡(Annexin-Ⅴ-FITC法)的效应.结果①恶性B淋巴细胞株CD40表达呈异质性,XG2高表达CD40,8266、Raji和Daudi中度表达,而XG7和U266不表达CD40.显微镜下观察发现,rhsCD40L(5μg/ml)可引起XG2或Daudi细胞的同型聚集,该效应在作用6～8*!h后即可出现;与CD40L-TC细胞共育后(肿瘤细胞:CD40L-TC=5∶1),XG2,Raji和Daudi 细胞可粘附于CD40L-TC表面;②rhsCD40L和CD40L-TC均可显著抑制XG2、Raji和Daudi细胞的体外增殖,导致XG2细胞呈现G1期阻滞,而Raji和Daudi细胞阻滞于G2期.并诱导XG2、Raji、Daudi细胞的凋亡,凋亡率分别为:XG2细胞23.3%和18.8%,Raji细胞11.6%和8.9%,Daudi 14.2%和15.9%;③表型分析显示: rhsCD40L、CD40L-TC可明显上调XG2、Raji和Daudi 细胞CD95的表达水平以及Raji细胞CD80的表达,而下调Raji 细胞CD18的表达.结论 rhsCD40L能直接并显著地抑制恶性B淋巴瘤细胞株Raji、Daudi和多发性骨髓瘤细胞株XG2的体外增殖,诱导其凋亡,并上调Raji细胞免疫共刺激分子CD80的表达,具有膜型CD40L的同样生物学功能, 故rhsCD40L具有潜在的抗恶性B淋巴细胞肿瘤的作用.
CD40激发对恶性B淋巴细胞体外生物学行为的影响
【摘 要】
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目的观察重组人可溶性CD40配体(rhsCD40L)及CD40L基因转染细胞(CD40L-TC)对恶性B淋巴细胞体外生物学行为的影响,探讨rhsCD40L在肿瘤生物治疗中的可能作用.方法利用基因工程技术获得了rhsCD40L和CD40L-TC,分别与恶性B淋巴细胞株XG2、XG7、U266、8226、Raji及Daudi共同作用,分析了CD40激发对肿瘤细胞的体外增殖(锥虫蓝计数法)、细胞周期(碘
【机 构】
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215007,苏州大学生命科学学院生物技术研究所
【出 处】
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中华血液学杂志
【发表日期】
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2002年23期
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