Nanog慢病毒载体构建及在胚胎干细胞分化调控中的应用

来源 :中国组织工程研究 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dykonka
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背景:在胚胎干细胞分化调控研究中,仍缺少安全有效的组织特异性启动子介导的荧光报告基因的慢病毒表达载体。目的:构建一个表达多能干细胞组织特异性启动子Nanog同时携带荧光报告基因和抗生素筛选基因的慢病毒表达载体Puro-Nanog-hrGFP,建立小鼠胚胎干细胞转基因细胞系,并观察其在小鼠胚胎干细胞细胞诱导分化过程中的表达。方法:利用PCR扩增Nanog基因,通过LR反应连接荧光报告基因hr GFP构建慢病毒表达载体Puro-Nanog-hrGFP。慢病毒包装并转导小鼠胚胎干细胞后运用嘌呤霉素筛选得到小鼠胚
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