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目的分别构建人S100A8(hS100A8)和S100A9(hS100A9)的PET-28a原核表达载体,并纯化hS100A8和hS100A9蛋白,为进一步研究hS100A8和hS100A9蛋白的分子生物学功能奠定实验基础。方法用带酶切位点的引物从hS100A8和hS100A9的真核表达载体扩增hS100A8和hS100A9基因片段,用相同的限制性内切酶双酶切PCR产物和pET-28a质粒。将两者用T4连接酶连接后转化入感受态细胞DH5α,提取质粒进行鉴定。将构建成功的pET28a-hS100A8和pET28a-hS100A9分别转化感受态细胞BL21,诱导蛋白表达,将等量纯化蛋白在一定钙离子浓度下室温孵育30 min,通过SDS-PAGE和Western blot验证异源二聚体是否形成。结果正确扩增出hS100A8和hS100A9基因,重组质粒pET28a-hS100A8和pET28a-hS100A9构建成功,纯化后在室温孵育后可形成异源二聚体。结论 hS100A8和hS100A9蛋白可以在体外形成异源二聚体,为探讨其生物学作用奠定理论基础。