【摘 要】
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利用体外环化的猪圆环病毒2型（PCV-2）全基因的感染性,建立一种分离PCV-2的方法。根据GenBank中PCV-2的基因序列,设计合成1对扩增PCV-2全基因组的特异性引物。通过PCR方法从广东
【机 构】
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内蒙古农业大学动物科学与医学学院,高明出入境检验检疫局,广东省农业科学院兽医研究所
【基金项目】
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国家食品安全重大专项（2001BA804A31）,广东省农业科技攻关（2003B21404、20052490100和2006B20301013）,广东省自然科学基金（04002083）,广东省自然基金重点项目（06105311）
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利用体外环化的猪圆环病毒2型（PCV-2）全基因的感染性,建立一种分离PCV-2的方法。根据GenBank中PCV-2的基因序列,设计合成1对扩增PCV-2全基因组的特异性引物。通过PCR方法从广东发病猪病料扩增到PCV-2全基因组片段,将该片段克隆入pMD18-T载体,筛选获得阳性重组质粒pM-DT-YF并测序。将所测序列与GenBank中发表的PCV毒株序列进行同源性比较。将质粒pMDT-YF大量扩增,经SacⅡ酶切质粒得到PCV-2全基因组,通过T4连接酶体外环化后,脂质体介导转染PK-15细胞,盲
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