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目的探讨Slit2/Robo4信号通路在输血相关急性肺损伤(TRALI)体外模型中的表达及作用。方法采用两次打击多形核中性粒细胞(PMNs)介导的人肺微血管内皮细胞(HMVECs)损伤模型作为TRALI体外模型,培养0、0.5、1、2、4、6 h后,采用Western-blotting法检测Robo4和血管内皮细胞钙粘连蛋白(VE-cadherin)表达,反转录酶PCR(RT-PCR)检测Robo4和Slit2信使RNA(m RNA)表达,体外内皮细胞通透性实验测定HMVECs通透性。加入不同浓度Slit2-N(0、0.5、1、4、10、20μg/L)与HMVECs一起温孵24 h后,检测HMVECs完整性和通透性。结果在TRALI体外模型中,Robo4和Slit2 m RNA的表达在各时间点的比较,差异均有统计学意义(F=12.880、11.060,P均<0.001);两者在2 h(0.72±0.04、0.78±0.05)、4 h(0.49±0.04、0.49±0.06)和6 h(0.34±0.03、0.43±0.11)均显著低于0 h(1.29±0.06、1.40±0.09),差异均有统计学意义(P均<0.05)。Robo4蛋白表达在各时间点的比较,差异有统计学意义(F=11.560,P<0.001);其在2、4和6 h(0.99±0.04、0.66±0.03、0.45±0.04)均显著低于0 h(1.44±0.04),差异均有统计学意义(P均<0.05)。同时发现,VE-cadherin蛋白表达在各时间点的比较,差异也有统计学意义(F=9.667,P<0.001);与0 h(1.46±0.09)比较,VE-cadherin的表达在2、4和6 h(0.91±0.08、0.78±0.05、0.50±0.04)也均有减少,差异均有统计学意义(P均<0.05)。体外内皮细胞渗透性试验提示,HMVECs通透性在各时间点的比较,差异有统计学意义(F=21.940,P<0.001);与0 h(1.42±0.16)比较,HMVECs通透性在2、4、6 h(4.00±0.35、5.70±1.71、10.02±2.24)均有增加,差异均有统计学意义(P均<0.05)。加入外源性Slit2-N后,VE-cadherin蛋白表达的比较,差异有统计学意义(F=13.220,P<0.001);与0μg/L Slit2-N组(0.41±0.08)相比,VE-cadherin在4、10、20μg/L Slit2-N组表达(1.19±0.35、1.49±0.13、2.12±0.21)均有增加,差异均有统计学意义(P均<0.05)。体外内皮细胞渗透性实验提示,HMVECs通透性比较,差异有统计学意义(F=19.430,P<0.001);与0μg/L Slit2-N组(10.0±2.2)相比,HMVECs通透性在4、10、20μg/L Slit2-N组(4.2±1.1、2.1±0.7、1.8±0.8)均有降低,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论 Slit2/Robo4信号通路可能参与TRALI的病理生理过程;使用外源性Slit2-N能调节TRALI体外模型中HMVECs的完整性和通透性,为治疗TRALI提供新的思路。