【摘 要】
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目的 建立一个模拟人类疾病进程的猪急性肝衰竭(ALF)模型,用于ALF治疗药物的临床前安全性评价及疗效评价,检测模型中猪纤维介素(pfg12)的表达情况,为针对fg12的基因治疗提供
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属同济医院感染性疾病研究所,武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科,武汉,430030
【基金项目】
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国家科技支撑计划;国家重点基础研究发展计划(973计划)资助项目
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目的 建立一个模拟人类疾病进程的猪急性肝衰竭(ALF)模型,用于ALF治疗药物的临床前安全性评价及疗效评价,检测模型中猪纤维介素(pfg12)的表达情况,为针对fg12的基因治疗提供基础和依据. 方法造模组耳静脉快速注射D-氨基半乳糖盐酸盐,剂量1.2 g/kg;对照组耳静脉快速注射5%的葡萄糖,剂量12 ml/kg.观察两组动物临床表现,肝功能指标和肝组织病理学改变,实时定量PCR检测肝组织中pfg12 mRNA表达,免疫组织化学检测肝组织中pfg12蛋白的表达.采用重复测量数据的方差分析和独立样本t检验进行统计学处理.结果 成功建立了与人在临床表现、肝脏生物化学指标、组织病理学改变相似的猪ALF模型;实时定量PCR检测结果显示造模组猪肝组织中pfg12的mRNA表达水平显著增加,与对照组比较,差异具有统计学意义(t=7.695,P＜0.05).免疫组织化学显示造模组猪肝组织中有明显的pfg12蛋白的表达,主要分布在肝细胞坏死区域的肝细胞、炎症浸润细胞、肝血窦内皮细胞及血管内皮细胞,对照组动物肝组织未见pfg12阳性着色.结论 以D-氨基半乳糖盐酸盐诱导的猪ALF模型可用于评价肝衰竭治疗药物的临床前疗效及安全性;pfg12在猪ALF动物模型的肝组织中异常高表达,提示其参与了ALF时肝细胞坏死的发生和发展过程.
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