赖脯胰岛素的稀释复性工艺

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通过单因素、正交和响应面等试验优化赖脯胰岛素原包涵体的稀释复性条件,结果显示:在胱氨酸12.0 mmol/L、半胱氨酸1.0 mmol/L、山梨醇8.0%、p H 10.0、包涵体蛋白质浓度1.0 mg/ml的条件下,赖脯胰岛素原的复性收率达到65%。赖脯胰岛素原经酶切与分离纯化后,得到了纯度为98.5%的赖脯胰岛素。纯化后的赖脯胰岛素经质谱鉴定、RPHPLC对比分析以及圆二色谱分析,各项指标均与理论值以及参比制剂一致,本研究为其工业化生产打下基础。
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