【摘 要】
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利用PCR方法以纳豆杆菌染色体DNA为模板扩增纳豆激酶基因片段,分别克隆到原核表达载体pBV220与真核表达载体pPICZαA上,转化大肠杆菌HB101与毕赤酵母GS115,筛选重组子,通过限
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利用PCR方法以纳豆杆菌染色体DNA为模板扩增纳豆激酶基因片段,分别克隆到原核表达载体pBV220与真核表达载体pPICZαA上,转化大肠杆菌HB101与毕赤酵母GS115,筛选重组子,通过限制性内切酶、PCR分析及序列测定,确定该重组子所携外源基因为纳豆激酶基因,对重组大肠杆菌与毕赤酵母中外源基因的稳定性进行研究比较,结果表明外源基因的插入对宿主菌的生长没有太大影响,重组质粒在E.coli HB101中具有良好的分离稳定性,而结构稳定性较差,而外源基因在毕赤酵母GS115中很稳定.
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