猪链球菌2型毒力因子部分片段的克隆与表达

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根据猪链球菌2型(Streptococcus suis type 2)胞外蛋白因子(extracellular factor protein,EF)的基因(epf)序列,设计合成一对引物,以猪链球菌2型江苏分离株SS2-H的基因组为模板,扩增epf基因1585-2547位序列,进行T/A克隆,转化入宿主菌DH5α中.提取阳性克隆质粒进行双酶切并纯化,将目的片段向克隆到表达载体pET-32a中组氨酸的下游,将重组质粒转化入大肠杆菌BL21中,经IPTG诱导可表达分子量约为53 000的融合蛋白.免疫转印分析
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