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目的
建立一种基于液相色谱串联质谱技术(LC-MS/MS)测定全血磷脂酰乙醇(PEth)的方法,用以客观、量化反映饮酒者酒精摄入水平。
方法全血样品中加入磷脂酰丙醇(16∶0/16∶0)作为内标,用异丙醇溶液沉淀蛋白,震荡、离心、提取上清、氮气吹干,复溶,液相色谱分离后进入串联质谱分析。考察方法的线性、检测限、定量限、回收率和精密度。收集40名有一年以上稳定日常饮酒习惯的志愿者全血样本,测定PEth,分析其与自述酒精摄入量的相关性;分析轻度、中度和重度饮酒者全血PEth水平的差异。
结果本方法线性相关系数大于0.999 2,检测限和定量限分别低于0.74 μg/L和2.48 μg/L。测定不同浓度PEth样本的批内和总不精密度分别为0.77%~3.18%和2.30%~6.95%。平均加样回收率为96.88%~102.99%。相关性分析显示,总PEth水平与志愿者自述饮酒量呈正相关(r=0.769, P<0.001)。Kruskal-Wallis分析显示不同程度饮酒者的总PEth水平差异有统计学意义(χ2=18.850, P<0.001)。
结论建立LC-MS/MS测定全血PEth的方法,该方法简便、精密、可靠,可以有效区分轻、中、重度饮酒者,有望为评价酒精摄入状况以及饮酒与疾病关系提供方法学基础。(中华检验医学杂志,2018, 41:103-108)