【摘 要】
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目的 探究miR-149-5p在氧化低密度脂蛋白胆固醇(ox-LDL)诱导的血管平滑肌细胞(VSMCs)中的功能及其分子机制.方法 用不同浓度的ox-LDL(0,25,50,100μg·mL-1)处理VSMCs 24h,或
【机 构】
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山西省心血管病医院(研究所)心血管内科,山西 太原 030024;山西医科大学 基础医学院,山西 太原030001
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目的 探究miR-149-5p在氧化低密度脂蛋白胆固醇(ox-LDL)诱导的血管平滑肌细胞(VSMCs)中的功能及其分子机制.方法 用不同浓度的ox-LDL(0,25,50,100μg·mL-1)处理VSMCs 24h,或用100 mg·mL-1的ox-LDL分别处理VSMCs 0,6,12,24 h,以实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)分别检测miR-149-5p和转化生长因子β2(TGFB2)mRNA在VSMCs中的表达水平.使用CCK-8实验和Transwell实验检测VSMCs的增殖和迁移能力.使用蛋白质印迹法检测TGFB2蛋白的表达水平.使用双荧光素酶报告基因实验验证miR-149-5p与TGFB2之间的靶向关系.结果 0,25,50,100μg·mL-1组VSMCs中miR-149-5p的表达水平分别为1.00±0.06,0.85±0.04,0.56±0.03,0.41±0.05,TGFB2 mRNA的表达分别为1.00±0.10,1.24±0.12,1.57±0.08,1.73±0.18;0,12和24 h组miR-149-5p的表达分别为1.00±0.12,0.87±0.04,0.63±0.07,0.38±0.03,而TGFB2 mRNA的表达分别为1.00±0.07,1.18±0.13,1.42±0.09,1.89±0.14,差异均有统计学意义(均P<0.05).对照组、miR-149-5p组、miR-149-5p+TGFB2组VSMCs细胞CCK-8实验OD值分别为0.71±0.08,0.42±0.06,0.61±0.04;迁移细胞数量分别为(114±9),(86±8),(104±6)个;TGFB2蛋白相对表达量分别为0.84±0.06,0.34±0.02,0.71±0.06,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 miR-149-5p通过靶向TGFB2抑制ox-LDL诱导的VSMCs的增殖和迁移.
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