【摘 要】
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目的 以网络药理学的方法探讨补肾清透方(Bushen Qingtou Prescription)治疗慢性乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)携带状态的核心靶点及信号通路等,进一步采用细胞实验验证预测靶点。方法 通过TCMSP、BATMAN和GeneCards数据库分别得到补肾清透方的药物活性成分、药物与疾病靶点,并将药物与疾病的交集靶点上传至STRING数据库以获取蛋白质-蛋
【基金项目】
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“十三五”国家科技重大专项(2018ZX10725505-002);
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目的 以网络药理学的方法探讨补肾清透方(Bushen Qingtou Prescription)治疗慢性乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)携带状态的核心靶点及信号通路等,进一步采用细胞实验验证预测靶点。方法 通过TCMSP、BATMAN和GeneCards数据库分别得到补肾清透方的药物活性成分、药物与疾病靶点,并将药物与疾病的交集靶点上传至STRING数据库以获取蛋白质-蛋白质相互作用图。运用DAVID6.7数据库对交集靶点富集分析,Cytoscape 3.7.2软件构建“药物-成分-共同靶点-疾病”网络图以获得核心活性成分及核心靶点,并通过AutoVina软件对核心靶点及活性成分进行分子对接。此外,观察补肾清透方对HepG2-HBx细胞系中HBx的影响,并使用蛋白免疫印迹法验证核心靶点蛋白的表达水平。结果 共得到补肾清透方治疗HBV携带状态的191个活性成分,478个药物靶点、1 705个疾病靶点,213个交集靶点。富集分析共涉及734个生物过程,86个细胞组分,141个分子功能,138条KEGG通路,通路主要与TNF、HIF-1、TOLL样受体等信号通道有关。网络图表明核心活性成分为槲皮素、木犀草素、山柰酚和β-谷甾醇,核心靶点为COX-2、COX-1及AR。分子对接结果显示核心成分及核心靶点的大多数结合能≤-5.0 kcal·mol-1,展现出较好的亲和力。细胞实验结果表明与空白组比较,HBx、COX-2表达在补肾清透方50μg·mL-1组稍下降(P<0.05),在100、200μg·mL-1两组中明显下降(P<0.01),COX-1表达在用药组中均明显升高(P<0.01),AR表达则无明显变化(P>0.05)。结论 补肾清透方可以通过多成分、多靶点及多通路防治HBV携带状态,而COX-2表达的下调及COX-1表达的上调可能是其发挥抗病毒作用的主要机制。
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