【摘 要】
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[目的]应用荧光差异显示技术筛选胃癌中特异表达的基因,并验证其在胃癌、食管癌中的表达,为进一步了解胃癌、食管癌发生、发展的分子机制提供帮助.[方法]应用荧光差异显示技
【机 构】
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江苏大学附属医院,江苏,镇江,212001江苏大学生命科学研究院,江苏,镇江,212001;
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[目的]应用荧光差异显示技术筛选胃癌中特异表达的基因,并验证其在胃癌、食管癌中的表达,为进一步了解胃癌、食管癌发生、发展的分子机制提供帮助.[方法]应用荧光差异显示技术(DD-PCR)分析胃癌及其相对应的正常胃黏膜组织,获得差异表达的基因片段,这些片段经过二次PCR再扩增后进行克隆和测序.通过在GenBank中同源性检索,查找与差异片段相对应的同源基因.应用半定量PCR,荧光定量PCR等方法进一步验证该基因在胃癌及食管癌中的表达差异.[结果]通过DD-PCR得到的差异片段中的一个片段对应于人Ⅰ型胶原蛋白基因.该基因的读码框长4 395bp,编码1 464个氨基酸,编码蛋白分子量约139.01kD.该基因在胃癌及食管癌组织中的表达量高于其对应的癌旁组织,并且在食管癌组织中的表达差异较胃癌中更明显.[结论]人Ⅰ型胶原蛋白基因在胃癌及食管癌中均呈高表达,推测其可能在胃癌及食管癌的发生发展中起作用.
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