【摘 要】
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目的 探讨富含亮氨酸的重复序列和钙调理蛋白同源域1(LRCH1)在狼疮肾炎模型小鼠调节性T细胞(Tregs)中的表达和功能.方法 6月龄C57BL/6小鼠和MRL/lpr小鼠,用流式细胞仪分选脾脏和肾脏内的CD45+CD4+CD25+CD127low Tregs,RT-qPCR检测Tregs LRCH1 mRNA水平.过继输注外源性Tregs至C57BL/6小鼠和MRL/lpr小鼠体内,RT-qPCR检测受者小鼠脾脏和肾脏内外源性Tregs LRCH1、IL-10和TGF-β的表达.用siRNA转染Tre
【机 构】
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湖北民族大学附属民大医院 肾病内科,湖北 恩施445000
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目的 探讨富含亮氨酸的重复序列和钙调理蛋白同源域1(LRCH1)在狼疮肾炎模型小鼠调节性T细胞(Tregs)中的表达和功能.方法 6月龄C57BL/6小鼠和MRL/lpr小鼠,用流式细胞仪分选脾脏和肾脏内的CD45+CD4+CD25+CD127low Tregs,RT-qPCR检测Tregs LRCH1 mRNA水平.过继输注外源性Tregs至C57BL/6小鼠和MRL/lpr小鼠体内,RT-qPCR检测受者小鼠脾脏和肾脏内外源性Tregs LRCH1、IL-10和TGF-β的表达.用siRNA转染Tregs干扰Lrch1的表达.然后,用流式细胞仪检测Tregs对传统T细胞增殖的抑制功能;以免疫印迹法检测IL-2信号途径的活化.结果 与野生型小鼠相比,MRL/lpr小鼠肾脏内的Tregs的LRCH1 mRNA增高4.13倍(P<0.05).过继输注实验显示,狼疮肾炎微环境诱导Treg细胞的LRCH1表达升高1.98倍(P<0.05),IL-10和TGF-β的表达升高13.83和3.58倍(P<0.05).Lrch1沉默使IL-2刺激下的p-STAT5降低约50％(P<0.05),导致IL-2信号转导受抑制,Foxp3表达下降,削弱了Tregs对传统T细胞增殖的抑制效应.结论 LRCH1对狼疮肾炎模型小鼠浸润性Tregs的免疫抑制功能有正调控作用.
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